二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒

簡(jiǎn)要描述：二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒是植物光合作用中固定 CO2 的關(guān)鍵酶，同時(shí)參與植物光呼吸代謝途徑，制約著碳素向Calvin 循環(huán)和光呼吸循環(huán)分流，作為一種能夠催化羧化反應(yīng)和加氫反應(yīng)的雙功能酶，其活性的大小對(duì)光合速率的研究具有重要意義。

產(chǎn)品型號(hào)： AKPL001U-1

所屬分類(lèi)：氧化與抗氧化系列

更新時(shí)間：2021-11-17

廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家

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詳情介紹

品牌	BOXBIO/盒子生工	貨號(hào)	AKPL001U-1
規(guī)格	25/24S	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒	應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,食品,生物產(chǎn)業(yè),制藥
檢測(cè)設(shè)備	紫外分光光度計(jì)	可檢測(cè)樣本數(shù)	24 Samples
主要檢測(cè)設(shè)備及配套	紫外分光光度計(jì)/1 mL石英比色皿(d=10 mm)	預(yù)計(jì)測(cè)定時(shí)間	3 h (25 Samples)
試劑儲(chǔ)存條件	按照標(biāo)簽要求儲(chǔ)存	需自備試劑	無(wú)
檢測(cè)方法	NADH速率法	檢測(cè)波長(zhǎng)	340 nm
信號(hào)響應(yīng)	遞增型

Rubisco可催化核酮糖-1,5-二磷酸（RuBP）和CO2結(jié)合生成3-磷酸甘油酸，3-磷酸甘油酸可進(jìn)一步在3-磷酸甘油酸激酶和甘油醛-3-磷酸脫氫酶的催化作用下生成甘油醛-3-磷酸，反應(yīng)過(guò)程中伴隨著NADH氧化生成NAD+，NADH在340 nm處有特征吸收峰，通過(guò)測(cè)定340 nm處吸光度的下降速率即可表征Rubisco活性。

二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒測(cè)定過(guò)程中所需要的儀器和試劑：紫外分光光度計(jì)、1 mL 石英比色皿、恒溫水浴/培養(yǎng)箱、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、研缽/勻漿器和蒸餾水。
樣品處理 ①細(xì)菌或細(xì)胞：離心收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量（104 個(gè)）：提取液體積（mL）為（500-1000）：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴超聲破碎細(xì)菌或細(xì)胞（功率 20%或 200 W，超聲 3 s，間隔 10 s，重復(fù) 30 次），4℃ 10000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測(cè)。 ②組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）為 1：（5-10）的比例（建議稱(chēng)取約 0.1 g 組織，加入 1 mL 提取液）處理樣品，冰浴勻漿，4℃ 10000 g 離心 10 min，取上清置于冰上待測(cè)。
二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶活性檢測(cè)試劑盒吸光值測(cè)定：①立即混勻放入 25℃水浴或培養(yǎng)箱中并開(kāi)始計(jì)時(shí)，測(cè)定 20 s（總時(shí)間）時(shí) 340 nm 處吸光值，記為 A1 測(cè)定和 A1 空白；②準(zhǔn)確反應(yīng) 300 s，測(cè)定 320 s（總時(shí)間）時(shí) 340 nm 處吸光值，記為 A2 測(cè)定和 A2 空白；③計(jì)算 ΔA 測(cè)定=A1 測(cè)定-A2 測(cè)定，ΔA 空白=A1 空白-A2 空白，ΔA=ΔA 測(cè) 定-ΔA 空白。注：空白組只需測(cè)定 1-2 次；準(zhǔn)確在 20 s 和 320 s 處完成讀數(shù)，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確。